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Corning NK免疫細胞活化擴增培養套裝
Corning NK細胞活化擴增培養套裝：擴增能力強，在14天內可達到100倍擴增效應細胞比例高，可達80％操作方便
Corning® NK細胞活化擴增培養套裝
NK細胞是當今免疫-治療常用的細胞。但是NK細胞培養操作難度大，對培養條件、培養技術(shù)要求很高，難以獲得高純度高效能的活性細胞。 Corning NK細胞活化擴增培養基套裝由多個(gè)組分組成，為 NK細胞培養提供簡(jiǎn)便的操作方案。使用該套裝所獲得細胞數量產(chǎn)量高，活性高，具有很高的殺傷效應。
Corning® NK細胞活化/擴增培養套裝
英文名：Corning® NK Expansion Kit
中文名：Corning® NK細胞活化擴增培養套裝
應用：NK細胞活化擴增
品牌產(chǎn)地：美國Corning
保存：2°C - 8°C
貨號：88-570-kit
產(chǎn)品組成
NK細胞活化培養基
NK細胞活化添加劑
NK細胞擴增培養基
抗體預包被T75細胞培養瓶
細胞培養袋
產(chǎn)品特色
擴增能力強，在14天內可達到100倍擴增
效應細胞比例高，可達80％
操作方便
產(chǎn)品訂購信息
品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 包裝 |
Corning | 88-570-kit | NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK細胞活化/擴增培養基套裝 | 1Kit |
套裝包含 | 活化用 | Pre-coated T-75 flask 抗體預包被T75細胞培養瓶 | 1瓶 |
NK primary medium NK細胞活化培養基 | 1×50 mL | ||
NK primary supplement NK細胞活化添加劑 | 1×1.8 mL | ||
擴增用 | Expansion medium NK細胞擴增培養基 | 1×1000 mL | |
配件 | 細胞培養袋 | 1 x 640 cm2 |
華雅再生醫學(xué)旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司授權代理Corning免疫細胞治療產(chǎn)品。紅榮微再以“傳遞科學(xué)價(jià)值，服務(wù)科學(xué)研究"為宗旨，主營(yíng)干細胞、精準醫療、細胞治療、器官再生四大板塊的產(chǎn)品。
： ：150、210、10459。紅榮微再-客服: 經(jīng)銷(xiāo)商專(zhuān)員
Corning® NK細胞活化擴增培養套裝
Corning® NK細胞活化擴增培養套裝性能
圖1. NK細胞在Corning培養基中能夠得到更有效的擴增
圖2. Corning培養基中獲得的NK細胞具有更高的細胞毒性
健康人的PBMC細胞接種數量為3x107 ，根據廠(chǎng)家建議進(jìn)行細胞培養。使用Corning培養基時(shí)，0-5天使用NK活化培養基 (Primary Medium)，6-14天使用NK 擴增培養基 (NK Expansion Medium )添加1000 IU/mL IL-2 進(jìn)行培養。細胞培養至14天收獲，進(jìn)行細胞計數和腫瘤殺傷能力檢測。腫瘤殺傷實(shí)驗
使用的靶細胞為K562細胞。
圖３. Corning培養基中獲得的NK細胞具有更高的CD3-CD56+陽(yáng)性率 (83.0% vs 67.6%)。
健康人的PBMC細胞根據廠(chǎng)家建議進(jìn)行細胞培養。細胞培養至14天收獲，進(jìn)行細胞計數和檢測。細胞使用CD3 FITC /CD56 PE進(jìn)行染色，之后使用BD AccuriTM C6 flow cytometer進(jìn)行檢測。
Corning® NK細胞活化擴增培養套裝使用方法
NK 細胞擴增和活化
1. 抗凝血室溫離心，400 xg，10min，上層血漿轉移到新管。
2. 熱滅活自體血漿，56°C，30min。離心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血漿，培養備用。
3. 加入等體積PBS（不含鈣鎂）替代被移除血漿保持體積不變，小心重懸血細胞。
注意：PBS預加0.1%人血清白蛋白（HSA）利于保持血細胞活性。
4. 使用淋巴細胞分離液從上面的血樣中制備PBMCs（人外周血單個(gè)核細胞）。
注意：使用新鮮采集的人血（2h內采集）有利培養，不要使用超過(guò)24h的血樣。
5. 至少5倍體積的PBS（不含鈣鎂）清洗PBMCs。室溫離心500xg，10min，收集PBMCs。
6. PBMCs稀釋到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培養基配比1.8mL NK活化添加劑和10%自體血漿。
7. 預包被T-75培養瓶使用前，用PBS（不含鈣鎂）清洗兩次。
8. 添加30 mL PBMC懸液到預包被T-75培養瓶，37°C，5% CO2培養。
注意：第六天之前，如果培養基變黃，細胞密度超過(guò)2.0 x 106 cells/mL，需要添加新鮮的NK活化培養基配比10%自體血漿，保持細胞密度大于 5 x 105 cells/mL。
9. 培養第六天，培養液離心，適量NK擴增培養基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）重懸細胞，再轉移到T-225培養瓶或透氣細胞培養袋。
10. 每隔兩三天，根據細胞擴增狀態(tài)，培養體系中添加新鮮的NK擴增培養基（1000 IU/mL IL-2 和10%自體血漿）保持細胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之間。
注意：NK擴增階段，所加新鮮培養基自體血漿含量推薦范圍：0.5%-1%。
11. 培養14天左右，收獲NK細胞。
注意：整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中，細胞懸液吹打和培養容器拍打都要輕柔，以避免細胞損傷，保持細胞活性。
咨詢(xún)Corning® NK細胞活化擴增培養套裝歡迎，： ：150、210、10459。紅榮微再-客服: 經(jīng)銷(xiāo)商專(zhuān)員
