心肌分化試劑盒包含有多肽類(lèi)分化因子和涉及心肌細胞分化關(guān)鍵信號通路的調控因子的無(wú)血清培養基。在對人ESCs和iPSC不同細胞系的實(shí)驗中，本試劑盒能得到心肌細胞分化效率比所有已發(fā)表方法都高的結果。
心肌分化試劑盒的特點(diǎn)主要有以下幾點(diǎn)：
1.單層培養，均質(zhì)分化
2.多細胞系可重復性好
3.跳動(dòng)層細胞7天即可觀(guān)察
4.誘導分化程序簡(jiǎn)單便捷
心肌分化試劑盒的凍存方法：
1、如果需要將心肌細胞長(cháng)期保存，可對心肌細胞進(jìn)行凍存，凍存操作會(huì )導致40%左右的細胞死亡。
2、37℃水浴預熱PBS溶液和Accutase傳代工作液，4℃預冷心肌分化試劑盒。
3、吸走心肌維持培養基，并且加入PBS溶液洗一次。
4、加入Accutase傳代工作液使之*覆蓋皿/瓶底。
5、37℃孵育15-20分鐘，顯微鏡下觀(guān)察到大部分細胞相互分離，表面細胞消化時(shí)間理想。
6、用槍扇形吹打培養皿/瓶底，使皿/瓶底貼附的心肌細胞脫落，將細胞轉移至15ml離心管中，再向皿/瓶中加入適量PBS溶液潤洗皿/瓶底，收集剩余細胞加入15ml離心管中。(注：吹打力度要輕柔，避免損傷心肌細胞)
7、200g離心5分鐘。棄去上清，用重懸細胞，輕柔吹打混勻。
8、按復蘇所需要的量，1ml每管凍存。
9、以1℃每分鐘的速率降至-80℃過(guò)夜(一般常見(jiàn)商品化凍存盒均可提供此條件)。
10、-80℃過(guò)夜后，將凍存細胞轉移至液氮保存。
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