淋巴細胞分離液
更新時(shí)間：2015-12-24 點(diǎn)擊次數：2496次
分離目的
方便在人體外對機體各種免疫細胞分別作鑒定，計數或功能測定。 淋巴細胞分離以后可以做淋巴細胞抗原片制備，E花環(huán)試驗，淋巴細胞轉化試驗，淋巴細胞培養（需無(wú)菌操作） 【分離原理】 人 淋巴細胞的方便來(lái)源是外周血，分離的原則是收率較高，純度較好，失活較低，根據不同試驗有相對純度，無(wú)論采用哪種方法，應盡zui大可能保持細胞應有活性。分 離的技術(shù)可根據細胞的物理性狀和表面標志設計，根據不同實(shí)驗目的可采用密度梯度離心法、吸附分離法和其它特殊分離法。此次實(shí)驗采用的1就是密度梯度離心法。其原理是：人外周血中各種細胞的密度不同，人紅細胞密度為1.093，粒細胞為1.092，淋巴細胞為1.074±0.001。密度梯度離心法的原理主要根據各類(lèi)血細胞比重的差異，利用比重介于某兩類(lèi)細胞之間的細胞分離液對血液離心，使一定比重的血細胞依相應的密度梯度分布于不同的獨立帶，從而達到分離的目的。
材料
1、肝素抗凝管，普通管（負壓），采血針，血清收集管 2、淋巴細胞分離液(比重1.077 – 1.080 g/mL）。 3、無(wú)Ca++、Mg++、Hank's 液 4、刻度吸管、毛細吸管、離心管、離心機等。 5置于冰箱的冷丙酮（固定細胞，保持細胞的完整性）
方法
1．采靜脈血2ml加入肝素抗凝管（或枸櫞酸鈉），3ml加入普通管。 2．普通管斜面放置30MIN，此時(shí)可分離淋巴細胞。用竹簽將血塊輕輕剝離管壁（主張用玻璃棒），2000rPm離心20分鐘，用毛細吸管吸取上清（血清）于血清收集管中，于4℃冰箱保存備用，用于以后的ELISA實(shí)驗，對流免疫電泳實(shí)驗和傷寒試管凝集實(shí)驗，溶血反應，免疫比濁測定補體C3或C4等等。（剝離時(shí)也可用毛細吸管輕輕剝離）
方便在人體外對機體各種免疫細胞分別作鑒定，計數或功能測定。 淋巴細胞分離以后可以做淋巴細胞抗原片制備，E花環(huán)試驗，淋巴細胞轉化試驗，淋巴細胞培養（需無(wú)菌操作） 【分離原理】 人 淋巴細胞的方便來(lái)源是外周血，分離的原則是收率較高，純度較好，失活較低，根據不同試驗有相對純度，無(wú)論采用哪種方法，應盡zui大可能保持細胞應有活性。分 離的技術(shù)可根據細胞的物理性狀和表面標志設計，根據不同實(shí)驗目的可采用密度梯度離心法、吸附分離法和其它特殊分離法。此次實(shí)驗采用的1就是密度梯度離心法。其原理是：人外周血中各種細胞的密度不同，人紅細胞密度為1.093，粒細胞為1.092，淋巴細胞為1.074±0.001。密度梯度離心法的原理主要根據各類(lèi)血細胞比重的差異，利用比重介于某兩類(lèi)細胞之間的細胞分離液對血液離心，使一定比重的血細胞依相應的密度梯度分布于不同的獨立帶，從而達到分離的目的。
材料
1、肝素抗凝管，普通管（負壓），采血針，血清收集管 2、淋巴細胞分離液(比重1.077 – 1.080 g/mL）。 3、無(wú)Ca++、Mg++、Hank's 液 4、刻度吸管、毛細吸管、離心管、離心機等。 5置于冰箱的冷丙酮（固定細胞，保持細胞的完整性）
方法
1．采靜脈血2ml加入肝素抗凝管（或枸櫞酸鈉），3ml加入普通管。 2．普通管斜面放置30MIN，此時(shí)可分離淋巴細胞。用竹簽將血塊輕輕剝離管壁（主張用玻璃棒），2000rPm離心20分鐘，用毛細吸管吸取上清（血清）于血清收集管中，于4℃冰箱保存備用，用于以后的ELISA實(shí)驗，對流免疫電泳實(shí)驗和傷寒試管凝集實(shí)驗，溶血反應，免疫比濁測定補體C3或C4等等。（剝離時(shí)也可用毛細吸管輕輕剝離）
上一篇 : BD P800采血管--為糖尿病疾病研究和藥物開(kāi)發(fā)保駕護航 下一篇 : 沒(méi)有了
員_a.png)