看完本篇你就知道反轉錄試劑盒的特點(diǎn)有哪些了
更新時(shí)間:2022-03-02 點(diǎn)擊次數:2250次
反轉錄試劑盒是一種高效、穩定、快速并可以去除基因組DNA污染的反轉錄系統。試劑盒采用分子進(jìn)化技術(shù)多點(diǎn)突變的新一代反轉錄酶LabScript M-MuLV RTase,大幅度提高了穩定性和反轉錄效率。
本試劑盒為一管式反轉錄預混反應液,5×RT MasterMix II中含有反轉錄第一鏈合所需的所有試劑。
通常Real-Time RT-PCR等實(shí)驗需要先用DNase I消化去除RNA中殘留的基因組DNA(gDNA),但是傳統DNase I處理復雜并容易造成RNA的降解和損失。
本試劑盒中使用了具有DNA分解活性的特殊4×gDNA Eraser Mix,2分鐘消除gDNA殘留,不需要DNase消化和后續繁瑣步驟。
下面讓我們一起來(lái)了解一下反轉錄試劑盒的特點(diǎn)吧:
1.制品為預先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以開(kāi)始反應。
2.可以在較短時(shí)間內高效合成Real Time PCR用cDNA,是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
3.使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉錄引物,可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4.新一代反轉錄酶LabScript M-MuLV RTase大幅度提高了穩定性和反轉錄效率。
5.采用gDNA Eraser僅需2分鐘清除DNA殘留,不需要DNase消化和后續繁瑣步驟。
6.全預混的反轉錄Mix,只需加入RNA和水,15分鐘簡(jiǎn)單快速完成反轉錄。
7.同時(shí)2種Mix在-20℃不易凍結,減少了化凍和混勻時(shí)間,使用更簡(jiǎn)單。
8.本產(chǎn)品針對qPCR進(jìn)行特別優(yōu)化oligo dT和N6隨機引物配比,使cDNA合成可從RNA轉錄本的各個(gè)區域起始并具有相同的反轉錄效率,大程度保證了qPCR結果的真實(shí)性和可重復性。
9. Real-time RT PCR定量需要建立標準曲線(xiàn),建立標準曲線(xiàn)的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時(shí),由于模板濃度低不穩定,因而會(huì )縮小曲線(xiàn)范圍,結果準確度降低。本制品中附加了標準曲線(xiàn)制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時(shí)也能夠進(jìn)行準確稀釋?zhuān)菀自趯拸V范圍內獲得準確定量的標準曲線(xiàn)。
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